山梨醇脫氫酶測試盒分析說明

山梨醇脫氫酶測試盒分析說明

產(chǎn)品說明： SDH（EC 1.1.1.14）催化山梨醇脫氫生成果糖，是調(diào)控生物體內(nèi)山梨醇含量的關(guān)健酶之一。SDH 催化山梨醇 脫氫生成果糖，同時還原 NAD+生成 NADH，生成的 NADH 能將電子傳遞給 NBT 生成紫色的甲臜，根據(jù)這一原 理可以計算 SDH 活性。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進(jìn)行檢測。

需自備的儀器和用品： 可見分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
山梨醇脫氫酶測試盒分析說明
樣本處理
1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（10 4個）：提取液體積 （mL）為 500~1000：1 的比例加入提取液（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1 mL 提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì) 胞（冰浴，功率 20%或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；8000 ×g 4℃離心 10 min，取上清，置冰上待 測。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1 g 組織，加入 1 mL 提取液）， 進(jìn)行冰浴勻漿。8000 ×g 4℃離心 10 min，取上清，置冰上待測。
3、血清（漿）樣本：直接檢測。