山梨醇脫氫酶測試盒分析說明

山梨醇脫氫酶測試盒分析說明

產品說明： SDH（EC 1.1.1.14）催化山梨醇脫氫生成果糖，是調控生物體內山梨醇含量的關健酶之一。SDH 催化山梨醇 脫氫生成果糖，同時還原 NAD+生成 NADH，生成的 NADH 能將電子傳遞給 NBT 生成紫色的甲臜，根據這一原 理可以計算 SDH 活性。

注意：實驗之前建議選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者 增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品： 可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
山梨醇脫氫酶測試盒分析說明
樣本處理
1、細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（10 4個）：提取液體積 （mL）為 500~1000：1 的比例加入提取液（建議 500 萬細菌或細胞加入 1 mL 提取液），超聲波破碎細菌或細 胞（冰浴，功率 20%或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；8000 ×g 4℃離心 10 min，取上清，置冰上待 測。
2、組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1 g 組織，加入 1 mL 提取液）， 進行冰浴勻漿。8000 ×g 4℃離心 10 min，取上清，置冰上待測。
3、血清（漿）樣本：直接檢測。